Coloration de May-Grünwald-Giemsa pour les frottis sanguins - Le Point Vétérinaire expert rural n° 330 du 01/11/2012
Le Point Vétérinaire expert rural n° 330 du 01/11/2012

HÉMATOLOGIE

Pas à pas

Auteur(s) : Michael Lallemand

Fonctions : Clinique vétérinaire Saint-Léonard
La Barre
49120 Melay

Le protocole demande peu de réactifs mais davantage de temps que les kits rapides. Le May-Grünwald-Giemsa offre plus de lisibilité pour la lignée blanche.

Pour effectuer un examen minutieux de la lignée blanche sur les frottis sanguins ou visualiser correctement les nucléoles sur des cytoponctions, il est possible d’utiliser un protocole de May-Grünwald-Giemsa (MGG) [2]. Celui que nous pratiquons est emprunté au dépistage du paludisme en médecine humaine [1].

Il permet notamment de réaliser un toxogramme, c’est-à-dire d’évaluer la sévérité et l’ampleur des modifications de la lignée granulocytaire provoquées par une endotoxémie (présence de corps de Döhle, basophilie cytoplasmique, vacuolisation du cytoplasme). Face à une mammite aiguë, pareille donnée a une valeur pronostique.

La préparation dure environ une demi-heure, mais l’opérateur peut s’absenter pendant les phases d’attente. Lorsque plusieurs lames sont à examiner, les colorations sont réalisées groupées dans la journée, à condition que l’étalement ait été effectué le plus vite possible, pour limiter les altérations cellulaires.

Les réactifs pour la MGG sont disponibles via les mêmes grossistes qui approvisionnent les laboratoires d’analyses de médecine humaine (par exemple la société VWR International). Pour une centaine d’euros investis, le praticien dispose de suffisamment de produits pour plusieurs années, au rythme de quelques lames par semaine. Le prix de revient est d’environ 20 centimes d’euros/unité (comprenant l’achat des lames et des réactifs).

Il est possible avec cette technique de se constituer une bibliothèque de lames intéressantes (elles se conservent au minimum 5 ans sans altération majeure, si elles sont rarement manipulées et stockées dans des boîtes adaptées).

La répétabilité est bonne avec cette coloration, et le contraste meilleur qu’avec les kits commerciaux plus largement utilisés par les praticiens (RAL555(r), Diff Quick(r), etc.), ce qui facilite l’examen des cytoponctions(1).

Pour la détection des Babesia, le MGG et les méthodes rapides se valent. Plus généralement, les kits commerciaux suffisent pour détecter les anomalies de la lignée rouge.

Nous utilisons aussi la coloration BCB (bleu de crésyl brillant) pour évaluer la régénération lors d’anémie. Cette autre technique et des exemples de lames seront présentés dans un prochain numéro.

  • (1) Voir pour un exemple d’application l’article « Actinobacillose atypique chez une vache holstein » du même auteur. Point Vét. (expert rural) 2012 ; 323(43): 44-48.

Références

  • 1. Martet G, Peyron F. Diagnostic du paludisme consultable en ligne http://asmt.louis.free.fr/niv3_0.3.html (pour la mise à jour en 2000).
  • 2. Siliart B, Nguyen F. Mémento biologique du vétérinaire. Éditions du Point Vét., Maisons-Alfort. 2007 : 320p.

REMERCIEMENTS

Remerciements à Vetofocus et au Dr Olivier Albaric.

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