Comment objectiver un stress oxydant chez le cheval

Le processus de stress oxydatif inclut l’étude des facteurs nocifs, du système de défense et des lésions oxydatives. Les radicaux libres peuvent être mesurés par eux-mêmes, mais les techniques requises, de par leur complexité, ne sont pas utilisées dans le cadre d’un diagnostic de routine.

SUPPORTS D’ÉVALUATION

Le stress oxydatif peut être mis en évidence dans différents substrats. Le sang veineux périphérique est l’un d’entre eux (plasma, sérum, cellules sanguines). L’analyse de l’air expiré est décrite dans plusieurs études. Ses limites sont essentiellement de deux sortes : seules des substances volatiles sont mesurables et la technique de prélèvement est délicate. L’urine est également informative. Cependant, son recueil peu pratique en limite l’emploi en routine. Le muscle strié squelettique est la cible principale du stress oxydant en raison de l’activité mitochondriale intense lors de l’effort. Une biopsie permet de l’étudier. En outre, un lavage broncho-alvéolaire peut être mis en œuvre. Dans ce cas, des facteurs de dilution sont fréquemment utilisés pour corriger la récupération très variable du fluide pulmonaire.

ENZYMES PROTECTRICES

→ La superoxyde dismutase (SOD), qui fait partie des enzymes les plus connues, est présente dans les cellules aérobies et facilement mise en évidence par la technique sur sang hépariné. Plusieurs études montrent que les différents types d’activité et l’âge ont une l’influence sur la SOD. Par exemple, une augmentation de l’action de cette dernière chez le cheval d’endurance et le trotteur révèle que l’exercice a un impact positif sur le système antioxydant.

→ La glutathion peroxidase (GPx) intervient dans la formation des hématies. Elle réduit l’hydroperoxide par le glutathion, qui entraîne la formation d’eau et de glutathion peroxydés. Son rôle est donc important. Sa mesure est facile à réaliser en routine.

→ La catalase permet de dismuter le peroxyde d’hydrogène (H₂O₂).

ANTIOXYDANTS NON ENZYMATIQUES

→ La vitamine E, en raison de sa structure, est liposoluble et joue un rôle majeur dans la protection des lipides membranaires, en coopération avec la vitamine C. La vitamine E, qui est insérée dans la bicouche lipidique, va capter l’électron libre pour éviter que les lésions ne se propagent aux acides gras adjacents. Elle est très sensible à la lumière et il convient de protéger le tube de sang hépariné lors de sa mesure.

→ Le glutathion est populaire et a fait l’objet de nombreuses études chez l’homme. Il en existe de deux sortes, selon qu’il est réduit (GSH, qui capte les radicaux libres) ou oxydé (GSSG).

Le ratio entre ces deux sortes de glutathion peut être mesuré. En routine, ce dosage est difficile, car la demi-vie de la substance est courte, et il est donc réservé à la recherche.

CAPACITÉ ANTIOXYDANTE TOTALE DU PLASMA ET DES HÉMATIES

Plusieurs auteurs préconisent de mesurer la capacité antioxydante totale du plasma et des hématies.

→ Pour le plasma, la prise en compte des composantes lipophile et hydrophile donne un aperçu global de ce phénomène. L’échantillon doit être conservé à – 20 °C et à l’abri de la lumière.

→ Pour les hématies, la technique est assez simple et consiste à mesurer le temps de de­mi-hémolyse. Plus celui-ci est prolongé, mieux c’est.

INDICATEURS DES LÉSIONS OXYDATIVES

Les radicaux libres sont délétères pour de nombreux éléments, indicateurs des lésions oxydatives, qui peuvent être mesurés.

→ Le malondialdéhyde figure parmi les produits de dégradation et augmente après un effort intense. L’échantillon sanguin doit être conservé à – 70 °C.

→ Le pool correspond à l’ensemble des dérivés de l’oxydation des lipides. Il permet une analyse plus globale que l’évaluation des marqueurs pris individuellement.

→ Le protox représente les dérivés de l’oxydation des protéines.

→ L’ADN est une autre cible des radicaux libres, avec le risque de cancérogenèse. Dans ce cas, il s’agit davantage d’agressions environnementales (métaux lourds, polluants, etc.). Des marqueurs des lésions de l’ADN peuvent être recherchés. Le dosage du 8-OHdG dans l’urine est en cours de développement en laboratoire. Cette technique est très utilisée chez l’homme.

• 1 Voir aussi en pages 22-23 de ce numéro.